Для чего нужна Нингидриновая реакция

Если вы занимаетесь анализом белков, то вы, безусловно, знакомы с нингидриновой реакцией. Это гистохимический тест на наличие белков, используемый для их количественного определения методами колориметрии или спектрофотометрии. В этой статье мы рассмотрим, для чего нужна нингидриновая реакция, как она работает и почему она является основой для количественного определения белков.

1. Что такое Нингидриновая реакция
2. Что открывает Нингидриновая реакция
3. Почему Биуретовая и Нингидриновая реакции являются универсальными для всех белков
4. Что показывает Биуретовая реакция
5. Дополнительные советы
6. Выводы

Что такое Нингидриновая реакция

Нингидриновая реакция, или Руэманна, является одним из наиболее распространенных методов количественного определения аминокислот и белков. В ходе этой реакции нингидрин (гидрат трикетогидриндена) доводится до кипения вместе с тестируемым раствором. Если в растворе присутствуют аминокислоты и белки, то Руэманнова реакция дает синюю окраску.

Что открывает Нингидриновая реакция

Нингидриновая реакция является группоспецифической и обнаруживает альфа-аминокислоты. В ходе реакции N-концевая аминокислота окисляется кислородом нингидрина и распадается с выделением аммиака, CO2 соответствующего альдегида. Таким образом, нингидриновая реакция открывает особые группы в молекуле белка.

Почему Биуретовая и Нингидриновая реакции являются универсальными для всех белков

Биуретовая и нингидриновая реакции являются универсальными для всех белков, так как они дают положительную реакцию на все аминокислоты и белки. Другие реакции, такие как ксантопротеиновая реакция или реакция Фоля, обусловлены радикальными группами определенных аминокислот и не могут быть использованы для количественного определения всех белков.

Что показывает Биуретовая реакция

Биуретовая реакция является качественной реакцией на все белки, а также продукты их неполного гидролиза, которые содержат не менее двух пептидных связей. В ходе этой реакции белок реагирует с раствором меди (II) в щелочной среде, происходят две реакции: образование биуретовой связи и окисление меди (II) до меди (I). В результате этой реакции образуется фиолетовый комплекс меди с белком, который можно наблюдать в визуальном тесте.

Дополнительные советы

Для более точного определения концентрации белков, можно использовать колориметрический или спектрофотометрический методы. Для этого необходимо знать поглощающую способность белка при определенной длине волны.

Определение концентрации белков методом Руэманна может быть затруднительно при наличии других соединений, которые могут давать синюю окраску. В таком случае можно использовать другие методы определения белков, такие как биуретовая реакция.

Выводы

Нингидриновая реакция является универсальным методом для количественного определения белков и аминокислот. Эта реакция открывает особые группы в молекуле белка, что позволяет определить его концентрацию. Биуретовая и нингидриновая реакции являются универсальными, так как они дают положительный результат на все белки. Для более точного определения концентрации белков можно использовать колориметрические и спектрофотометрические методы.